上海博谷生物科技有限公司-凯发k8娱乐官网网址多少

免疫荧光
                                                          免疫荧光实验流程

一.脱蜡至水

1.     二甲苯ⅰ(8min)

2.     二甲苯ⅱ(8min)

3.     无水乙醇和二甲苯1:1(5min)

4.     无水乙醇(3min)

5.     95%乙醇(3min)

6.     85%乙醇(3min)

7.     75%乙醇(3min)

8.     pbs3

二.抗原修复

edta抗原修复液修复。

抗原修复100  20min ; 自然冷却至室温。

三.pbst2遍,pbs1遍。每次5min

四.用30%h2o2和甲醇配制3%h2o2溶液。每张切片加1滴,室温下孵育10分钟,以阻断内源性过氧化物酶的活性。pbs3遍。

五.封闭  3-5%bsa或者1-2�s封闭30min

六.除去封闭液,每张切片加1滴或50μl的第一抗体,室温下孵育60分钟或4℃过夜,建议参见每种抗体的说明书。

   抗体稀释液: 1�s溶液(可以加0.01%叠氮钠)

七.洗一抗。pbs3遍,每次5min

八.孵二抗2h(室温)fitc标记山羊抗小鼠二抗1:500cy3标记的山羊抗兔二抗1500

九.洗二抗   pbs3遍,每次5min

十.擦干标本边缘水分,加dapi1ug/ml5min

十一. 把片子放pbs里,取一张擦干水分,加moutingsigma m1289,盖上盖玻片,指甲油封片。

          

 

")); } else { var _hmt = _hmt || []; (function() { var hm = document.createelement("script"); hm.src = "//hm.baidu.com/hm.js?4d0b85feb6b32cc6e23f8878f16683fa"; var s = document.getelementsbytagname("script")[0]; s.parentnode.insertbefore(hm, s); })(); }